转自:诺唯赞生物
看着大师姐留下的细胞实验条件却无法复现?同门的细胞稳定生长,你的细胞在摆烂边缘疯狂试探?
注意注意!
可能不是你的操作问题,而是你给细胞喝的"神仙水"出状况啦!!今天我们就来扒一扒科研人们又爱又恨的胎牛血清(FBS),揭开不为人知的血清冷知识!
细胞培养界的“液态黄金”
血清采自5 - 8月龄的胎牛心脏,通过无菌剖腹产和封闭式取血技术获取;富含生长因子、激素和营养物质(如氨基酸、维生素、脂类),能为细胞提供“保姆级”营养支持,尤其适合干细胞、免疫细胞等“娇贵”细胞。
取血流程大揭秘
无菌采血
母牛剖腹后,在洁净室层流罩下进行心脏穿刺,避免红细胞破裂污染。
四重过滤
0.8 μm、0.45 μm、0.22 μm、0.1 μm四级预过滤+三次0.1 μm精滤,确保无病原微生物。
冷冻保存
分装后-20℃速冻,全程冷链运输,避免反复冻融导致活性损失。
血清类型傻傻分不清楚?
实验室常见的牛血清主要分为胎牛和新生牛血清两种,二者在成分和来源上均有所差异。
“小黑点”和沉淀的信任危机
沉淀的真相
血清中的沉淀可能是纤维蛋白、磷酸钙或脂蛋白,尤其在反复冻融或热灭活后更明显。这类沉淀不影响细胞生长,只需离心取上清即可。
“小黑点”的多重身份
➤ 细胞碎片:过度吹打或消化过久导致的细胞碎片,PBS洗涤后可去除。
➤ 草酸钙、磷酸钙类物质:血液中草酸、磷酸离子在培养过程中析出,可能因布朗运动看似“活物”,实为无害。
➤ 脂蛋白/脂滴:胎牛血清富含脂类(如低密度脂蛋白LDL、胆固醇),在储存过程中可能形成微小聚集体,在显微镜下呈现为可移动的小黑点。
➤ 污染信号:若黑点伴随培养基浑浊或pH骤变,需排查细菌或支原体污染。
避坑建议
拒绝暴力解冻
4℃过夜缓慢融化,或20℃水浴融化,融化过程中最好每2 h轻轻摇动血清瓶身。避免37℃直接加热哦~
慎用热灭活
除非实验要求,否则会破坏生长因子并增加沉淀。
理解胎牛血清的生物学特性,本质上是掌握细胞代谢的"语言密码"。选择经过多重质控标准(生长活力测试、微生物安全验证、生化理化指标检测)的优质血清,能让您的科研数据更具说服力哦~
新品预告
细胞培养的神秘搭子,细胞房污染的天命克星水浴抑菌剂(D301)& 环境除菌喷雾(D302)即将来袭,敬请期待!
(转自:诺唯赞生物)